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摘要
[目的]为实现食品中唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病变种(Burkholderia gladioli pathovar cocovenenans)的快速检测，本研究基于体温扩增技术——酶促重组等温扩增(Enzymatic Recombinase Amplification，ERA)，建立了唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病变种三种可视化快速检测方法。[方法]根据唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病变种bonM基因序列设计和筛选了ERA检测引物和探针，分别建立了ERA显色法、荧光法、试纸条法三种可视化快速检测方法，并评估了方法的特异性和灵敏度，以及在市售样品检测适用性和准确性。[结果]检测结果显示，建立的方法对3株唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病型菌株检测均有扩增，其他常见的食源性致病菌以及其他唐菖蒲伯克霍尔德氏菌均无扩增，说明检测方法的特异性良好。三种方法的最低检出限均为10-2 ng/μL，灵敏度较好。采用建立的三种可视化快速检测方法对15份市售样品进行检测，结果显示2份检出阳性，检出率为13.3%。该结果与国标方法的检测结果一致，说明方法具有较好的适用性和准确性。[结论]本研究建立的基于体温扩增技术的显色法、荧光法和试纸条法三种可视化快速检测方法具有较高的特异性及灵敏度，37℃体温下扩增15 min左右即可获取检测结果，且裸眼可视，为食品中唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病变种的现场可视化快速筛查提供了新型简便的策略。
- 出版日期2023
- 单位黑龙江八一农垦大学; 中国检验检疫科学研究院; 生命科学技术学院
