利用荧光共振能量转移技术研究TGF-β/Smad3信号转导通路

作者：曹薇薇; 刘伟; 王维山; 陈召; 何仁豪; 何建伟

来源：生物医学工程学杂志, 2014, (05): 1080-1084.

• 转移生长因子-β
• Smad3
• 生物传感器
• 荧光能量共振转移 transforming growth factor-β1
• Smad3
• biosensor
• flurorescence resonance energy transfer

转移生长因子-β1(TGF-β1)/Smad3信号转导通路与人类的多种生理病理发生机制相关,但是该信号通路中Smad3被磷酸化的时空信息仍然不完全清楚。为了动态观察活细胞生理状态下Smad3被磷酸化的过程,首先进行ECFP-Smad3-Citrine(Smad3biosensor)融合蛋白表达载体的构建及鉴定;然后转染293T细胞并观察转染效率和融合蛋白表达情况。在荧光显微镜下,应用MetaFlour FRET 4.6软件测量TGF-β1刺激293T细胞前后Smad3biosensor的荧光能量共振转移(FRET)的变化情况。结果显示,Smad3biosensor转染效率达40%,融合蛋白表达...

• 出版日期2014
• 单位石河子大学; 石河子大学医学院第一附属医院