禽源HSP70、HSP40和RPL4基因的克隆和表达

作者:任红玉; 谢芝勋*; 谢丽基; 王盛; 黄娇玲; 邓显文; 谢志勤; 罗思思; 曾婷婷; 张艳芳; 范晴; 张民秀
来源:中国动物检疫, 2020, 37(03): 92-97.
DOI:10.3969/j.issn.1005-944X.2020.03.020

摘要

本研究参照GenBank中编码禽源热休克蛋白HSP70、HSP40和核糖体蛋白RL4等的基因序列,分别设计特异性引物,采用RT-PCR扩增HSP70、HSP40和RPL4基因,经双酶切后克隆到真核表达载体pEF1α-Myc,得到重组质粒pEF1α-Myc-HSP70、pEF1α-Myc-HSP40和pEF1α-Myc-RPL4;将构建好的重组质粒,转染HEK293T细胞后,采用间接免疫荧光和Western-blot技术,对目的蛋白进行验证。结果表明,Myc-HSP70、Myc-HSP40和Myc-RPL4融合蛋白在HEK293T细胞内得到了正确表达。本研究为后续禽源HSP70、HSP40和RPL4基因的功能研究奠定了基础。

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