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摘要
目的探索大鼠脑星形胶质细胞(astrocytes,AS)的分离、培养及对原代培养的AS进行纯化的方法并进行改进,提高AS纯度,为研究AS的生物学作用提供模型。方法取新生1~3 d的SD大鼠大脑,冰板上去除嗅球及海马,仔细剥离软脑膜,吸管反复轻柔吹打制备成细胞悬液,差速贴壁去除成纤维细胞,原代培养7~12 d,待细胞相互融合并铺满培养瓶底部后,3次消化传代,胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)进行免疫荧光鉴定。比较方法改进前后AS纯度的变化。结果采用本实验改进的方法所分离培养出的AS纯度可达95%以上,方法改进后较改进前所培养的AS细胞GFAP免疫荧光阳性率(即AS细胞纯度)显著提高(P<0.05)。结论经改进后的AS培养方法能够获取高纯度的AS,用于建立AS体外模型及研究体系。
- 出版日期2014
- 单位哈尔滨医科大学附属第二医院
