本发明公开无DNA残留的RNA提取试剂盒及RNA提取方法，无DNA残留的RNA提取试剂盒包括RNA洗脱液、DNA洗脱液、至少一个与RNA洗脱液配合使用的DNA吸附柱以及至少一个与DNA洗脱液配合使用的RNA吸附柱。RNA提取方法RNA提取方法，至少包括如下两个步骤：A步骤，用RNA洗脱液将DNA吸附柱上的RNA洗脱下来；B步骤，用DNA洗脱液将RNA吸附柱上的DNA洗脱下来。本发明简单快速，提取的RNA纯度高，DNA残留少，一般紫外灯下肉眼不能见到DNA残留。
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