干扰素基因刺激因子启动子的克隆、鉴定及活性分析

作者：王艳艳; 金蕊; 徐**; 周国平

来源：江苏医药, 2015, 41(13): 1489-1491.

DOI：10.19460/j.cnki.0253-3685.2015.13.001

• 干扰素基因刺激因子
• 启动子活性

目的克隆和鉴定干扰素基因刺激因子(STING)基因上游启动子序列,并评价其在人胚肾HEK-293T细胞中的启动活性。方法以人全血DNA为模板,PCR扩增STING启动子区2154bp序列。将此片段亚克隆至pGL-3基本载体荧光素酶报告基因上游的多克隆位点,构建重组报告质粒pGL-3/STING。转染HEK-293T细胞,检测其荧光素酶活性,并利用生物信息学方法分析转录因子结合位点。结果经酶切、测序鉴定,成功构建了含有STING启动子序列的表达质粒。与pGL-3基本质粒相比,pGL-3/STING启动子的相对荧光素酶活性增加(P<0.01)。STING启动子区域含SRY、HSF、AP1、Sp1/3、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白和GATA-1等多个转录因子结合序列。结论 STING转录起始位点上游2154bp区域在HEK-293T细胞中具有较强的启动活性。

• 出版日期2015
• 单位南京医科大学第一附属医院