circRNA CPSF6核内转移促进同型半胱氨酸诱导的滋养细胞凋亡

作者:高丽娜; 吴琪瑞; 殷荷; 刘林英; 吴玉珠; 张玉月; 王艳华; 吴凯; 张慧萍*
来源:细胞与分子免疫学杂志, 2022, 38(02): 146-152.
DOI:10.13423/j.cnki.cjcmi.009334

摘要

目的 探讨环状RNA剪切及多聚腺苷酸化特异因子6 (circRNA CPSF6)在同型半胱氨酸(Hcy)致滋养细胞凋亡中的作用及机制。方法 体外培养HTR-8/SVneo人绒毛膜滋养层细胞,分为对照组(0 mmol/L Hcy处理)与1 mmol/L Hcy处理组。采用免疫荧光细胞化学染色检测滋养细胞胱天蛋白酶3(caspase-3)的表达,Western blot法检测caspase-3蛋白水平;实时定量PCR检测circRNA CPSF6的mRNA表达水平;同时,运用小干涉RNA(siRNA)技术敲低滋养细胞circRNA CPSF6表达,Western blot法检测细胞caspase-3、 caspase-9、 B细胞淋巴瘤分子2(Bcl2)、 Bcl2相关X蛋白(BAX)表达;实时定量PCR检测circRNA CPSF6在Hcy处理前后滋养细胞胞质/胞核中的表达水平。结果 与对照组相比,Hcy处理组caspase-3表达明显增加,circRNA CPSF6 mRNA表达上调;敲低circRNA CPSF6后,caspase-3表达降低,线粒体凋亡途径被抑制;正常培养的滋养细胞中circRNA CPSF6在胞质大量表达,而给予Hcy处理后,circRNA CPSF6主要在胞核表达。结论 通过circRNA CPSF6核内转移激活线粒体凋亡途径促进Hcy诱导的滋养细胞凋亡。

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