癌胚抗原磷脂酰肌醇蛋白聚糖3单克隆抗体的制备及应用

作者：王玉亮; 刘涛; 穆红

来源：天津医药, 2014, (03): 235-237+296.

• 磷脂酰肌醇蛋白聚糖类
• 抗体
• 单克隆
• 重组融合蛋白质类
• 杂交瘤
• 细胞系
• 癌
• 肝细胞
• 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3
• 单克隆抗体 glypicans
• antibodies
• monoclonal
• recombinant fusion proteins
• hybridomas
• cell line
• carcinoma
• hepatocellular
• GPC3
• monoclonal antibody

目的制备抗癌胚抗原磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)单克隆抗体,并初步应用。方法利用PCR方法,将GPC3基因重组到原核表达载体pET16b中,在大肠杆菌中表达,纯化后的GPC3融合蛋白对Balb/c小鼠脾内包埋免疫,取小鼠脾细胞与Sp2/0细胞进行细胞融合,应用间接酶联免疫吸附测定(ELISA)和Western blot法筛选及鉴定分泌特异性抗GPC3单克隆抗体的杂交瘤细胞株,间接免疫荧光检测肝癌细胞中GPC3表达。结果成功构建了GPC3原核表达载体,在大肠杆菌中的诱导表达重组GPC3蛋白。应用单克隆抗体杂交瘤技术成功制备1株稳定分泌抗GPC3单克隆抗体的杂交瘤细胞株,通过Western bl...

• 出版日期2014
• 单位天津市第一中心医院