定点突变技术提高β-葡萄糖苷酶活性

作者：李沛华; 郭雪睿; 彭继燕; 陈惠; 唐自钟; 金伟琼; 王欢; 韩学易

来源：基因组学与应用生物学, 2016, 35(08): 2083-2091.

DOI：10.13417/j.gab.035.002083

• β-葡萄糖苷酶
• 定点突变
• 酶学性质
• 大肠杆菌

β-葡萄糖苷酶(Bgl)是纤维素水解过程中的限速关键酶。提高Bgl的酶活,对于增强纤维素酶水解力有着十分重要的作用。本研究根据3D同源模建及分子对接,预测分析活性中心,利用定点突变做出针对性的改造。对来源于米曲霉的β-葡萄糖苷酶基因进行六个位点的定点突变,并将其在大肠杆菌中进行了突变基因的高效表达。经IPTG诱导后,分离纯化并进行酶学性质分析,获得酶活力提高的两个突变位点(Asn347Ser,Gly235Met),结果表明N347S和G235M位点的突变使酶的比活力显著提高,比原始酶活分别提高了43.1%和14.7%。这一研究为进一步提高β-葡萄糖苷酶活性研究提供一定的理论依据。

• 出版日期2016
• 单位生命科学学院; 四川农业大学