摘要
目的利用慢病毒感染的方法建立能稳定表达前列腺特异性膜抗原(PSMA)和荧光素酶的PSMA+-PC3细胞系,并将其接种到裸鼠皮下检测其成瘤能力。方法包装表达PSMA的慢病毒和表达荧光素酶的慢病毒,将其感染PC3细胞后,用嘌呤霉素进行筛选,建立能够稳定表达PSMA和荧光素酶的PSMA+ -PC3细胞和仅表达荧光素酶的PSMA--PC3细胞;利用流式细胞术检测PSMA的表达情况。将PSMA+ -PC3和PSMA- -PC3细胞接种于裸鼠皮下建立荷瘤模型,利用生物发光成像法观察其在体内的成瘤情况,利用免疫组织化学染色法检测PSMA+ -PC3和PSMA- -PC3肿瘤组织中PSMA的表达情况。结果成功建立了能够稳定表达PSMA和荧光素酶的PSMA+ -PC3细胞和仅表达荧光素酶的PSMA- -PC3细胞,流式细胞术检测证实PSMA+ -PC3细胞上PSMA呈阳性表达,小动物活体成像结果显示PSMA+ -PC3和PSMA- -PC3细胞均可有效成瘤,免疫组织化学染色检测证实PSMA+ -PC3肿瘤上PSMA的表达为阳性。结论成功建立了能稳定表达PSMA和荧光素酶的PSMA+ -PC3细胞系,并在裸鼠体内证实其可有效成瘤,为靶向PSMA的研究提供了有用的细胞和动物模型。
- 出版日期2017
- 单位西京医院; 第四军医大学