Acyl-ACPs的规模化合成

作者：丁威; 冯延宾; 曹旭鹏; 薛松

来源：中国生物工程杂志, 2018, 38(04): 63-69.

DOI：10.13523/j.cb.20180409

• acyl-ACP合成酶
• acyl-ACP
• 高效液相色谱

脂酰-酰基载体蛋白(fatty acyl-acyl carrier protein,acyl-ACP)是多种生物合成途径中的酰基供体。因供给限制,体外研究常用类似物acyl-CoA替代,而CoA部分和ACP有较大差异,限制了相关酶对底物识别的认识。因此稳定获得大量acyl-ACP是体外研究相关酶的催化机制及其代谢途径的关键。研究以holo-ACP和C4C18链长脂肪酸为底物,在哈氏弧菌acyl-ACP合成酶(Vibrio harveyi acyl-ACP synthetase,VhAasS)催化下合成不同碳链长度的acyl-ACP;通过高效液相色谱(HPLC)方法,确定不同碳链长度acyl-ACP的合成产率。结果表明:碳链为C4C14的acylACP产率均高于90.0%,16∶0-ACP产率为85.9%,18∶1-ACP产率仅为25.7%。通过加入Li+优化反应体系,16∶0-ACP、18∶1-ACP的产率达90.0%。进一步优化扩大反应体系可稳定获得20mg以上acyl-ACP;最后,把合成的acyl-ACP应用到甘油-3-磷酸酰基转移酶催化的反应体系中。不同链长acyl-ACP的规模化合成研究,为体外研究相关酶的催化机制提供重要基础。

• 出版日期2018
• 单位中国科学院大连化学物理研究所; 中国科学院大学