农杆菌介导转化平邑甜茶子叶外植体的研究

作者：代红艳; 李文然; 刘霁菡; 刘月学; 张志宏

来源：沈阳农业大学学报, 2011, (06): 663-667.

• 平邑甜茶
• 子叶
• 转化
• 再生
• 农杆菌 Malus hupehensis var.pingyiensis
• cotyledon
• transformation
• regeneration
• Agrobacterium

以近轴端子叶为外植体,研究了菌液浓度、菌液浸泡时间、共培养时间及推迟筛选对根癌农杆菌介导的苹果属植物平邑甜茶转化效率的影响,建立了平邑甜茶高效的转化体系。结果表明:较优转化体系是将成熟胚接种在胚萌发培养基上培养,7～10d后剪取近轴端子叶,子叶外植体在OD600=0.5的EHA105菌液中浸泡10min后在再生培养基上共培养5d,然后在附加20mg.L-1Kan和400mg.L-1Cef的再生培养基上选择培养,在此转化体系上平邑甜茶抗性芽再生率达9.0%。对27个Kan抗性株系的叶片进行GUS组织化学染色分析,23个株系呈现出GUS染色阳性反应。本研究为平邑甜茶的基因工程育种奠定了重要基础。

• 出版日期2011
• 单位沈阳农业大学