annexinA2基因片段的克隆、表达、纯化及多克隆抗体的制备

作者：聂纪芹; 汪龚泽; 刘朝奇

来源：中国免疫学杂志, 2012, (01): 67-70.

• 人源annexinA2基因片段
• 原核表达
• 蛋白纯化
• 多克隆抗体 Human annexinA2 gene sequence
• Prokaryotic expression
• Protein purification
• Polyclonal antibody

目的:构建人源annexinA2基因片段的原核表达载体,表达并纯化蛋白,制备多克隆抗体。方法:从GenBank(BC093056.1)中获得人源annexinA2基因的cDNA序列并根据不含信号肽的编码序列设计引物,用PCR的方法扩增编码an-nexinA2基因部分序列,将其克隆到原核表达载体pET28a( )中表达annexinA2的蛋白。表达的蛋白产物利用切胶回收的方法纯化,用His抗体进行Western blot鉴定。用纯化的目的蛋白作为抗原免疫日本大耳白兔,获得annexinA2的抗血清,通过ELISA测定兔多克隆抗体的滴度。在CaSki细胞内采用细胞免疫荧光(CIF)和流式细胞术(F...

• 出版日期2012
• 单位三峡大学