底物消除法测定微粒体酶动力学参数的实用性分析

作者：段俊敏; 王晓莹; 郭宾; 陈波; 姚守拙

来源：中国卫生检验杂志, 2011, (07): 1691-1694.

• 底物消除
• 酶动力学
• 细胞色素P450
• 微粒体 Substrate deletion
• Enzymatic kinetics
• Cytochrome P450
• Microsome

目的:以细胞色素P450酶(CYP)的特异性底物非那西丁(CYP1A2)和右美沙芬(CYP2D6)为探针,比较底物消除法和传统产物生成法测定的差异,评价底物消除法的可行性。方法:基于高效液相色谱技术建立底物及其特征代谢物的定量分析方法,测量底物在不同起始浓度下的消除初速率("底物消耗法")和形成产物的初速率("产物生成法");采用线性回归法和曲线拟合法求算酶动力学参数Km和Vmax。结果:采用底物消除法测得非那西丁(CYP1A)的Km和Vmax与产物生成法相近;但测定CYP2D活性时,因右美沙芬同时被小鼠肝微粒体其它同工酶代谢,所得表观参数有较大差别。结论:对特异性强的探针药物,两方法结果一致...

• 出版日期2011
• 单位湖南师范大学