单端羧基聚乙二醇/鱼精蛋白系统介导HSV-TK基因在宫颈癌细胞中的体外研究

作者：谢日志; 胡海梅^*; 李晓琳

来源：广东药学院学报, 2014, 30(01): 85-91.

• 非病毒基因载体
• 端羧基聚乙二醇/鱼精蛋白
• HSV-TK
• 基因治疗
• 体外

目的研究非病毒载体MPEG-C-鱼精蛋白系统的制备方法、其对不同剂量鱼精蛋白与单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)的结合能力以及对HeLa细胞的影响。方法将一定量的MPEG-C-和不同量的鱼精蛋白混合后与DNA室温孵育,得到MPEG-C-鱼精蛋白/DNA复合物;用琼脂糖电泳实验测定不同N/P比形成复合物时对HSV-TK的阻滞情况;用结合沉淀试验比较不同量鱼精蛋白对包裹HSV-TK的能力的影响;MTT法检测MPEG-C-鱼精蛋白对HeLa宫颈癌细胞的毒性作用及其复合物对HeLa细胞的转染率。结果 MPEG-C-鱼精蛋白复合物包裹HSV-TK的能力随N/P比增大而增强;粒径随N/P比增大而减小,可达200 nm左右;复合物的Zeta电位随N/P比增大而增强;与单独鱼精蛋白复合物相比,细胞转染率有所降低。结论 MPEG-C-鱼精蛋白是一种制备工艺简单、对HSV-TK包裹能力高、细胞毒性小、具有一定价值的非病毒载体。

• 出版日期2014
• 单位广东药学院