hBSP与GFP非融合表达载体的构建及乳腺癌细胞转染条件优化

作者：杜红延; 王捷; 郭勇; 郑霖; 杨静; 刘大志

来源：华南理工大学学报(自然科学版), 2005, (11): 46-50.

• 骨唾液蛋白
• 荧光蛋白
• 重组表达载体
• 乳腺癌细胞
• 转染
• 优化 bone sialoprotein
• fluorescent protein
• recombinant expression vector
• breast cancer cell
• transfection
• optimization

为进一步研究骨唾液蛋白(BSP)在乳腺癌细胞骨转移的整个过程中的作用,首先要建立稳定高效表达BSP的乳腺癌细胞系.文中首先从构建好的pB-hBSP载体中亚克隆hbsp基因,构建重组质粒pIRES2-hBSP-EGFP,然后利用脂质体介导转染特异性骨转移的乳腺癌细胞MDA-MB-231BO,优化一系列转染条件以提高转染效率,再利用G418和流式细胞仪筛选获得稳定转染细胞.结果发现:在96孔板中,细胞融合度达到90%;用1μg脂质体介导280 ng重组质粒转染10 h,转染效率最高可达(19.70±1.10)%.

• 出版日期2005
• 单位华南理工大学; 广州军区广州总医院