摘要

目的构建以大鼠WAP启动子调控的人血小板生成素(TPO)真核表达质粒并进行瞬时表达,探讨TPO基因组中不同内含子对TPO表达影响。方法通过基因工程方法构建以大鼠WAP启动子调控的6种TPO真核表达质粒,并通过酶切和测序进行鉴定,将上述重组质粒分别在HC-11和COS-1细胞上转染48 h后,通过双抗体夹心ELISA定量分析转染上清中TPO表达。结果酶切及测序分析表明构建与设计相符,6种重组质粒在COS-1细胞和HC-11细胞中均获得表达,其表达水平从高到低依次为pTPOWE>pTPOWA>pTPOWD>pTPOWB>pTPOWC>pTPOWF,其中含有TPO IntronⅤ的重组质粒pTPOW...