Toll样受体4对高糖诱导胰岛微血管内皮细胞株凋亡蛋白表达的影响

作者：刘明明; 张晓艳; 武清斌; 尚飞; 李炳蔚; 李爱玲; 李宏伟; 修瑞娟

来源：微循环学杂志, 2017, 27(03): 16-21.

• 胰岛微血管内皮细胞
• Toll样受体4
• 细胞凋亡
• 基质金属蛋白酶
• 糖尿病

目的:观察小鼠胰岛微血管内皮细胞(MS1)Toll样受体4(TLR4)的表达及其对高糖诱导凋亡蛋白表达的影响。方法:离体小鼠MS1分为低浓度葡萄糖(5.6mM)对照组(C组)、高浓度葡萄糖(25.0mM和35.0mM)诱导组(HG组)、TLR4抑制剂干预组(35.0mM葡萄糖+1μM CLI-095,HG+CLI组)及TLR4抑制剂对照组(5.6mM葡萄糖+1μM CLI-095,CLI组)。平行培养24h或48h后,先用CCK-8法检测C组和HG组MS1细胞活力,选定高糖干预浓度(35.0mM)及时间(48h);再分别应用免疫组化和Western Blotting检测各组MS1细胞TLR4表达水平;应用Western Blotting检测各组MS1细胞凋亡蛋白Caspase-9、Caspase-3表达水平;应用明胶酶谱分析法检测基质金属蛋白酶2(MMP2)活性变化。结果:与C组比较,HG组MS1的TLR4蛋白表达显著增加(P<0.01);凋亡蛋白Caspase-9和Caspase-3表达均显著升高(P<0.01,P<0.05);MMP2活性明显增强(P<0.05);与HG组比较,HG+CLI组Caspase-9水平均明显降低(P<0.01),Caspase-3水平仅有降低趋势,差异无统计学意义(P>0.05);TLR4的表达和MMP2活性虽有下降,但差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论:MS1高表达TLR4可能参与高糖诱导的MS1细胞凋亡。

• 出版日期2017
• 单位中国医学科学院北京协和医学院