科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
为探索人畜共患单核细胞增生李斯特菌的应激调控因子Sigma B(σB)在抗应激过程中的激活机制,本研究以pERL3为骨架,通过SOE-PCR技术构建携带3种不同σB依赖型启动子控制下的gfp基因的报告质粒,并利用荧光酶标仪分析携带这些报告质粒载体的单增李斯特菌在酸或盐应激条件下的σB活性以及不同σB调控子在应激条件下对σB激活能力的影响。结果显示:sigB自身启动子PsigB比P0880和P1602更为敏感,可以准确指示σB的活性;盐应激比酸应激对σB的激活程度高;5%的NaCl和30 min的应激时间足以对σB产生显著的激活效应;rsbS、rsbT和rsbV基因缺失显著降低σB在应激中的激活水平,而rsbX基因不介导应激诱导的σB激活。本研究所构建的GFP报告质粒可以准确指示单增李斯特菌的σB活性,可以用于应激条件下σB激活机制的研究。
- 出版日期2016
- 单位宁波卫生职业技术学院; 浙江大学
