科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
使用水曲柳悬浮细胞结合超声辅助处理，开发了一种有效且可重复的根癌农杆菌介导的遗传转化方法。以GUS和GFP为目标基因，悬浮细胞为受体材料，以不同时间的超声加真空处理辅助农杆菌介导法进行水曲柳悬浮细胞遗传转化研究。结果显示：以对数生长期的水曲柳悬浮细胞作为转化受体，根癌农杆菌浓度OD600nm为0.6时，与2 g悬浮细胞进行混合，并在超声波中超声90 s，真空下10 min进行侵染转化，共培养之后接种在添加50 mg/L卡那霉素和500 mg/L头孢霉素的固体或液体培养基中选择培养，所得筛选后细胞可观察到明显的GUS染色与GFP荧光，PCR能得到两条清晰的目的基因条带，说明获得了水曲柳转基因悬浮细胞。实验证明使用超声加真空辅助的农杆菌介导法可以有效的对水曲柳悬浮细胞进行遗传转化。
- 出版日期2021-9-22
- 单位生命科学学院; 林木遗传育种国家重点实验室; 东北林业大学
