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摘要
背景:目前克拉霉素耐药机制的研究主要集中于对幽门螺杆菌(H.pylori)23S rRNA基因的分析,其他基因与克拉霉素耐药的关系在国内外尚未见报道。目的:应用蛋白质组学技术分析不同克拉霉素浓度下耐药H.pylori菌株的发生机制,以期发现新的克拉霉素耐药相关基因。方法:以H.pylori 26695为出发菌株,在含克拉霉素平皿上选择耐药突变体,提取全菌蛋白后通过双向凝胶电泳(2-DE)分离蛋白,银染后应用Image Master 2D Elite软件比较不同浓度克拉霉素耐药株和野生株的蛋白表达差异,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行鉴定,并在NCBI的H.pylori蛋白数据库中搜索理论上酶解肽段能与之相匹配的蛋白。结果:共10个蛋白点在耐药株与野生株以及不同浓度耐药株间有明显差异,其中3个蛋白点为DNA指导的RNA多聚酶α亚单位,其表达量和等电点在耐药株与野生株间存在明显差异;1个蛋白点为黄素氧化还原蛋白,其在耐药株中的表达量上调;2个蛋白点为30S核糖体蛋白S1,其在耐药株中的表达量下调;3个蛋白点为过氧化氢酶,其在耐药株中的表达量上调;1个蛋白点为细胞分裂抑制剂,其在低浓度克拉霉素耐药株中的表达量较野生株上调,而在高浓度克拉霉素耐药株中的表达量较野生株下调。结论:不同浓度克拉霉素耐药株的耐药机制有不同的相关靶点,为研究H.pylori 23S rRNA以外克拉霉素的耐药机制提供了线索。
- 出版日期2007-9-25
- 单位中国疾病预防控制中心传染病预防控制所; 天津医科大学总医院
