目的研究在核酸序列水平定位DNA损伤的方法。方法培养TK6细胞,抽提基因组DNA,制备k-ras基因外显子2的单链探针。酶切基因组DNA构建损伤模型,应用依赖随机化末端连接物PCR(RDPCR)进行Southern blot,对产物进行测序。结果酶切DNA的RDPCR产物在相应位置出现杂交条带,测序证实损伤位于Hinf在k-ras外显子2的酶切位点。结论将RDPCR和测序技术结合在一起,可在核酸水平上准确定位DNA损伤的碱基位置。
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