AKT2 3'-UTR荧光素酶报告基因载体构建及与miRNA-625靶向关系验证

作者：魏斌; 邓霞; 卞秀娟; 钱粉红

来源：江苏大学学报(医学版), 2016, (03): 204-207.

DOI：10.13312/j.issn.1671-7783.y160052

• miRNA-625
• AKT2基因
• 荧光素酶报告基因
• 3'端非翻译区 miRNA-625
• AKT2 gene
• luciferase reporter gene
• 3'-UTR

目的:通过构建荧光素酶报告基因重组质粒验证miRNA-625与AKT2基因的靶向调控关系。方法:通过生物信息学软件预测AKT2为miRNA-625靶基因;构建野生型AKT2基因3'端非翻译区荧光素酶报告基因载体及miRNA-625靶序列突变型载体;将HEK-293T细胞株随机分为野生型+miRNA-625组、野生型+miRNA内参组、突变型+miRNA-625组、突变型+miRNA内参组;Lipofectamine 2000转染相应的质粒与miRNA,双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶活性。结果:构建野生型及突变型荧光素酶报告载体鉴定正确,双荧光素酶报告基因检测系统显示野生型+miRNA-62...

• 出版日期2016
• 单位江苏大学