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摘要
目的定点突变幽门螺杆菌标准菌株ATCC26695 hsp60基因的1398、1399位点,并获得基因突变后hsp60基因的原核表达蛋白。方法采用Primer Premier5.0软件设计hsp60基因的2对引物,引入2个突变位点,通过重叠延伸PCR法进行3次扩增,获得突变型hsp60基因,克隆至原核表达载体pEASY-E1,重组质粒转化至E. coli BL21(DE3),对其进行测序验证,经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE电泳检测表达产物。结果将幽门螺杆菌hsp60基因1398、1399位点AG突变为GC,构建了突变型hsp60基因的表达载体,转化大肠埃希菌后高效表达可溶性hsp60蛋白...
