敲除基因Pabpc6对雄性小鼠精子发生的影响

作者：汤洁琳; 柳俊; 邹定峰; 缪时英; 宋伟; 李凯^*

来源：基础医学与临床, 2023, 43(04): 560-567.

DOI：10.16352/j.issn.1001-6325.2023.04.0560

• 精子发生
• PABPC6
• 雄性生殖

目的 探究小鼠细胞质多聚腺苷酸结合蛋白-6(PABPC6)在雄性小鼠精子发生中的作用。方法 利用CRISPR/Cas9靶向敲除C57BL/6J小鼠基因Pabpc6,通过PCR鉴定Pabpc6的敲除情况。通过交配繁殖得到Pabpc6+/+、Pabpc6+/-、Pabpc6-/- 3种不同基因型的小鼠，进行睾丸称重、形态学观察和精子计数。RT-qPCR和Western blot检测不同组织中Pabpc6在mRNA和蛋白的表达水平；通过免疫荧光和苏木精-伊红染色观察该基因的定位以及睾丸曲细精管内部形态学变化。结果 成功鉴定出敲除Pabpc6的小鼠；Pabpc6在睾丸组织中高表达(P<0.001)。免疫荧光显示该基因主要表达于精母细胞和早期精子阶段，基因敲除小鼠与野生型小鼠相比在睾丸外形、精子形态、精子数量和曲细精管内部形态上没有明显差异。结论 Pabpc6在小鼠睾丸组织中高表达，敲除该基因后对雄性小鼠的精子发生无明显影响，说明该基因所编码的蛋白对于小鼠精子发生过程可能是非必需的。

• 出版日期2023
• 单位医学分子生物学国家重点实验室; 北京协和医学院; 中国医学科学院基础医学研究所