酿酒酵母组成型表达甜叶菊糖基转移酶UGT76G1及相关性质研究

作者：王钰; 陈量量; 杜婷; 李艳; 严明; 郝宁; 许琳

来源：食品工业科技, 2015, 36(13): 162-170.

DOI：10.13386/j.issn1002-0306.2015.13.025

• 酿酒酵母
• 组成型启动子
• 糖基转移酶UGT76G1
• 全细胞催化
• 莱鲍迪甙A

本研究将酿酒酵母穿梭质粒p ESC-Leu的诱导型启动子GAL1和GAL10分别替换为PGK1和TEF1启动子,构建了组成型双启动子表达载体p ESCD,再将甜叶菊糖基转移酶UGT76G1的编码基因亚克隆到p ESCD的Sal I和Xho I酶切位点之间,构建了组成型表达UGT76G1的重组质粒p ESCD-UGT。将p ESCD-UGT转化到酿酒酵母YPH499中进行表达,结果确定该重组酵母在SD-L液体培养基培养24h达到稳定期,菌体培养8h蛋白表达量高,选用1%的甲苯作为重组菌全细胞催化的通透剂时,催化15h产生288mg/L的莱鲍迪甙A,其产量是对照组的5倍。

• 出版日期2015
• 单位南京工业大学