钝齿棒杆菌乙酰谷氨酸激酶编码基因argB的克隆表达、纯化及酶学性质研究

作者：刘飞; 饶志明; 徐美娟; 许泓瑜; 张晓梅; 窦文芳; 许正宏

来源：工业微生物, 2010, (04): 23-28.

• 钝齿棒杆菌
• 乙酰谷氨酸激酶
• 表达
• 纯化
• 酶学性质 Corynebacterium crenatum
• acetylglutamate kinase
• gene expression
• purification
• characterization

本研究的钝齿棒杆菌(Gorynebacterium crenatum SYPA)是筛选得到的高产精氨酸突变菌株,其中argB基因编码的乙酰谷氨酸激酶(NAGK)是精氨酸合成过程中的关键酶。为了进一步研究该酶的相关特性,以钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum SYPA)基因组为模板,扩增得到其arB基因,成功构建了pET-28a-argB重组质粒,并在E.coli BL21(DE3)中诱导后高效表达。利用载体pET-28a上的His6·Tag标记选用Ni柱亲和层析法纯化表达具有活性的NAGK,纯化后酶的比活力达到7.28 U/mg,纯化倍数达66.18。并对该酶的酶学性质...

• 出版日期2010
• 单位江南大学