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摘要
为了建立百合斑驳病毒（Lily mottle virus,LMoV）的快速检测方法,采用RT-PCR方法从感染LMoV的百合叶片中克隆该病毒的外壳蛋白（coat protein,CP）基因,然后连接到原核表达载体pET28a（+）上,导入大肠杆菌Escherichia coliBL21（DE3）并诱导表达,以表达的重组蛋白为抗原制备该病毒的抗血清。结果显示:LMoVCP全长为822 bp,编码274个氨基酸;SDS-PAGE及Western blot检测结果表明,经IPTG诱导得到了分子量约为34 kD带有HIS标签的目的蛋白;用该蛋白制备的抗血清经间接ELISA和Western blot检测结果显示,其效价为1∶51 200,具有较高的特异性,可用于感染LMoV百合的检测,其检测结果与RT-PCR检测结果一致。
- 出版日期2017
- 单位医药学院; 大连理工大学
