禽肾炎病毒与鸡细小病毒双重PCR检测方法的建立

作者：张艳芳; 谢芝勋^*; 邓显文; 谢志勤; 张民秀; 罗思思; 谢丽基; 范晴; 曾婷婷; 黄娇玲; 刘加波

来源：中国动物检疫, 2019, 36(12): 58-62.

DOI：10.3969/j.issn.1005-944X.2019.12.013

• 禽肾炎病毒
• 鸡细小病毒
• 多重PCR
• 特异性
• 敏感性

为了同时检测禽肾炎病毒(avian nephritis virus,ANV)和鸡细小病毒(chicken parvovirus,ChPV),根据GenBank中ANV的ORF基因和ChPV的NS1基因的保守序列,设计筛选了扩增片段大小分别为511 bp和242 bp的特异性引物,通过反应条件优化、特异性和敏感性试验,建立了一种双重PCR检测方法。该方法最佳引物比例为ANV上下引物各0.4μL(20 mol/L),ChPV上下引物各0.6μL(20 mol/L);最佳退火温度为53.8℃;灵敏度可达到55 fg(ANV)和58 fg(ChPV);对常见鸡病病原体进行检测,结果全为阴性。本研究建立的PCR方法具有特异、敏感、快速、稳定的优点,可用于同时鉴别诊断ANV和ChPV的混合感染。

• 出版日期2019
• 单位广西壮族自治区兽医研究所