转基因小麦外源基因插入位点初步分析及检测方法的建立

作者：段晓亮; 许兰杰; 刘志勇; 梁荣奇

来源：粮油食品科技, 2014, (04): 76-81.

DOI：10.16210/j.cnki.1007-7561.2014.04.022

• sGNA
• 转基因小麦
• 插入位点
• 边界序列
• 检测方法 sGNA
• transgenic wheat
• insertion site
• boundary sequence
• detection method

利用染色体步移(genome-walking)原理和巢式PCR方法,对转基因小麦外源基因sGNA插入位点的序列特征进行了分析,并以此建立了sGNA基因转化事件特异性检测的方法。根据sGNA基因的核苷酸序列设计特异引物,利用Takara公司提供的简并随机引物,通过染色体步移法扩增到了转sGNA基因株系zy2-18的插入位点的边界序列,分析得到的边界序列可知,外源基因片段是通过部分同源重组的方式与小麦基因组进行整合的,整合位点位于A染色体组。检测结果显示携带外源基因sGNA的质粒在与小麦基因组整合的过程中发生了剪切,且Ubi启动子与bar基因被切除,保留了两个串联的NOS基因,且在4500~452...

• 出版日期2014
• 单位国家粮食局科学研究院; 中国农业大学