广西猪瘟病毒变异株分离鉴定及其E2基因遗传特性分析

作者：高跃美; 梁晶晶; 王文锋; 唐紫燕; 陈俊蓉; 周桂全; 蓝常力; 刘芳; 罗廷荣^*; 李晓宁^*

来源：南方农业学报, 2023, 54(05): 1539-1548.

• 猪瘟病毒(CSFV)
• E2基因
• 分离鉴定
• 序列分析
• 2.3亚型

【目的】明确猪瘟病毒（CSFV）广西分离株的分子流行病学特点和病原学特性，为科学使用CSF疫苗及有效防控广西CSFV流行提供参考依据。【方法】2019年12月—2020年10月，从广西南宁、隆安、柳州、百色及北海等地采集疑似CSFV感染的流产胎儿、死胎、木乃伊胎和弱仔猪的组织（心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和淋巴结等）进行CSFV检测，通过PK-15细胞进行病毒分离，采用RT-PCR和间接免疫荧光试验（IFA）进行鉴定，克隆CSFV分离株E2基因，经DNASTAR进行核苷酸序列及推导氨基酸序列同源比对分析后以MEGA 6.0构建遗传进化树；同时以Shimen标准株为对照，检测感染PK-15细胞后分离株的生长曲线、病毒mRNA和E2蛋白水平。【结果】从104份疑似CSFV感染样品中分离出1株CSFV，命名为GXNN2019-13，接种至PK-15细胞后并未出现细胞病变。GXNN2019-13株与我国Shimen标准株（强毒）和HCLV株（弱毒）的E2基因核苷酸序列相似性较低，分别为84.6%和83.5%，而与日本CSF0745株及德国CSF0496和Alfort Tuebingen株的相似性分别为93.9%、92.2%和91.5%;GXNN2019-13株与Shimen和HCLV株的E2氨基酸序列相似性分别为89.3%和88.7%，与日本CSF0745株及德国CSF0496和Alfort Tuebingen株的相似性分别为95.5%、94.6%和93.8%；以HCLV株为参照进行多序列比对，发现GXNN2019-13株E2蛋白较Shimen标准株的变异程度更高。感染PK-15细胞后，GXNN2019-13株的病毒复制能力弱于Shimen标准株，生长曲线上各时间点的病毒效价及mRNA水平均低于Shimen标准株。【结论】从疑似CSFV感染病料分离获得的GXNN2019-13株属于2.3亚型中的独立小分支，与之前的广西分离株亲缘关系较远，可能是新的变异毒株，其复制能力弱于Shimen标准强毒株。

• 出版日期2023
• 单位广西大学; 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室