摘要

针对生化及临床检测分析中生物小分子浓度低、变化范围大等特点,基于功能化双链DNA复合纳米结构,构建了一种宽范围、低检出限的荧光传感检测方法。功能化双链DNA由3’端含有多个碱基T的核酸适体(PolyTn-Apt)和5’端修饰FAM荧光基团的互补链(cDNA@FAM)构成,在纳米金(AuNPs)表面修饰该功能化双链DNA,由于荧光共振能量转移作用FAM荧光处于猝灭状态;加入被测物后,核酸适体与被测物结合,双链被打开,FAM远离AuNPs,荧光恢复。碱基T的存在可使AuNPs结合更多的双链结构,扩大其传感检测范围。结果表明:以该方法制备的三磷酸腺苷(ATP)传感器检测范围可达1 nmol/L~100 μmol/L,跨5个数量级,检出限为0.41 nmol/L,且特异性明显;以该方法制备的氨苄西林(AMP)传感器检测范围可达1 nmol/L~50 μmol/L,跨4个数量级,检出限为0.42 nmol/L,且特异性突出。该方法具有一定的普适性,通过置换核酸适体种类,有望对多种生物小分子实现宽范围、低检出限的定量检测。