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摘要
目的：检测circSMRCA5在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达，并探讨其在NSCLC中的潜在功能和机制。方法:用qRT-PCR检测circSMARCA5在NSCLC组织中的表达。使用慢病毒转染法将circSMARCA5过表达质粒和对照质粒pLC5分别转染人肺癌A549和H1975细胞。采用qRT-PCR法检测稳定转染细胞系中circSMARCA5的表达水平。通过CCK-8、克隆形成、细胞周期和异种移植瘤实验检测A549和H1975细胞的功能。机制上，我们通过转录组测序，以确定circSMARCA5可能的靶基因，再进一步通过体外动物实验和流式细胞术探索其可能调控机制。结果:circSMARCA5在NSCLC组织中表达上调。过表达circSMARCA5可以在体内外促进NSCLC细胞的增殖。机制上，经KEGG和GO富集分析，确定CCL5为circSMARCA5的下游靶基因，western blot和免疫组化结果也显示circSMARCA5可以上调CCL5的表达。circSMARCA5介导的CCL5上调促进了免疫正常的C57小鼠皮下肿瘤的生长。C57小鼠皮下肿瘤制备成的单细胞悬液行流式细胞术检测显示，circSMARCA5过表达组的Treg细胞比例和数目均高于对照组，提示circSMARCA5经CCL5募集Treg细胞促进NSCLC的增殖。结论:circSMARCA5可通过CCL5将Treg细胞招募到肿瘤中，导致肿瘤的免疫逃逸，促进NSCLC的进展，为NSCLC的潜在治疗提供了新的生物标志物和靶点。
- 出版日期2023
- 单位中心实验室; 南京中医药大学; 第一临床医学院
