检测鸭呼肠孤病毒抗体间接ELISA方法的建立

作者：孙陈莉; 杨瑞; 王义敏; 赵娜; 张小荣; 彭大新; 吴艳涛

来源：中国兽医学报, 2014, (01): 26-29+38.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2014.01.005

• 鸭呼肠孤病毒
• σB重组蛋白
• 原核表达
• 间接ELISA duck reovirus
• recombination proteinσB
• prokaryotic expression
• indirect ELISA

RT-PCR扩增鸭呼肠孤病毒(Duck reovirus,DRV)的σB基因,克隆到pET-32a(+)表达载体,再转化大肠杆菌Transetta(DE3);含有重组质粒pET-σB的大肠杆菌经IPTG诱导,获得大小为55 000的以包涵体形式表达的σB重组蛋白。Western blotting显示,σB重组蛋白能够与兔抗DRV多抗血清特异性结合。以高亲和NI-NTA树脂在变性条件下纯化、梯度尿素复性的σB重组蛋白为包被抗原,建立了检测DRV抗体的间接ELSIA方法。分别以间接ELSIA方法和血清中和试验对DRV感染鸭血清和SPF鸭血清进行检测,两者的符合率为100%。该间接ELSIA方法对鸭...

• 出版日期2014
• 单位扬州大学