虎纹捕鸟蛛毒素XI(HWTX-XI)突变体的真核表达及活性鉴定

作者：王凡; 王小娟; 宁蔚文; 刘中华

来源：生物工程学报, 2011, (02): 262-268.

DOI：10.13345/j.cjb.2011.02.010

• 虎纹捕鸟蛛毒素XI
• 真核表达
• 突变体
• 胰蛋白酶抑制活性
• 钾离子通道抑制活性 HWTX-XI
• mutant
• eukaryotic expression
• trypsin inhibition activity
• potassium channel inhibition activity

虎纹捕鸟蛛毒素-XI(HWTX-XI)是从虎纹捕鸟蛛粗毒中分离的含55个氨基酸残基的蛋白质,兼有胰蛋白酶抑制活性和电压门控钾离子通道抑制活性。通过突变HWTX-XI上的钾离子通道抑制活性关键氨基酸残基设计了2个突变体(分别突变以下氨基酸残基:R5I,R10T,R25A和R5I,R25A),利用pVT102U/α表达载体在酿酒酵母S78中成功表达并获得了高纯度的重组蛋白质;通过分光光度计比色法、膜片钳技术和小鼠脑室注射分别比较三者的胰蛋白酶和钾通道抑制活性以及动物毒性,结果显示:HWTX-XI突变体与HWTX-XI有相同胰蛋白酶抑制活性,但其钾通道活性降低约30倍;小鼠脑室注射HWTX-XI的半...

• 出版日期2011
• 单位湖南师范大学