腺病毒介导的重组 Tum5基因抑制视网膜新生血管的实验研究

作者：孙靖; 杨伟; 张琰; 薄其玉; 张红

来源：中华眼底病杂志, 2015, (4): 371-376.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1005-1015.2015.04.015

• 视网膜新生血管化/预防和控制
• 基因转移技术
• 转染
• 动物实验

目的：观察腺病毒介导的重组 Tum5基因(rAd-Tum5)对氧诱导视网膜病变(OIR)模型小鼠视网膜新生血管的抑制作用。方法7日龄 C57BL/6J 小鼠96只,随机分为正常组、OIR 组、rAd-绿色荧光蛋白(GFP)空载体组(OIR rAd-GFP 组)和重组 Tum5基因组(OIR rAd-Tum5组),每组均为24只。参照文献方法建立 OIR 模型。12日龄时,OIR rAd-GFP 组、OIR rAd-Tum5组小鼠双眼玻璃体腔分别注射病毒滴度为1×1011 pfu/ml 的 rAd-GFP、rAd-Tum5病毒1μl。OIR 组、正常组小鼠双眼玻璃体腔分别注射等体积无菌生理盐水。视网膜铺片观察视网膜无灌注区相对面积,病理切片计数突破内界膜的视网膜前细胞核数,免疫荧光法及蛋白免疫印迹法检测小鼠视网膜中血管内皮生长因子(VEGF)表达情况。结果正常组、OIR 组、OIR rAd-GFP 组、OIR rAd-Tum5组小鼠视网膜无灌注区相对面积比较,差异有统计学意义(F =61.224,P <0.01)。组间视网膜无灌注区相对面积比较,OIR rAd-GFP组与 OIR 组差异无统计学意义(P =0.827)；OIR rAd-Tum5组与 OIR 组、OIR rAd-GFP 组差异均有统计学意义(P <0.01)。4组间突破内界膜的视网膜前细胞核数比较,差异有统计学意义(F =635.738,P <0.01)。组间突破内界膜的视网膜前细胞核数比较,OIR rAd-GFP 组与 OIR 组差异无统计学意义(P =0.261)；OIR rAd-Tum5组与 OIR 组、OIR rAd-GFP组差异有统计学意义(P <0.01)。与正常组小鼠视网膜 VEGF 表达比较,OIR 组和OIR rAd-GFP组 VEGF 表达均上调,OIR rAd-Tum5组小鼠视网膜 VEGF 表达较 OIR 组和 OIR rAd-GFP 组呈下降趋势。结论重组 rAd-Tum5基因可以抑制视网膜新生血管生成,可能与下调 VEGF 表达有关。

• 出版日期2015
• 单位天津医科大学; 天津医科大学眼科医院