低丰度基因Real-time PCR相对定量方法的建立

作者：黄聪琳; 王晓琳; 郭敏; 姜华

来源：药物生物技术, 2014, (06): 534-537.

DOI：10.19526/j.cnki.1005-8915.2014.06.010

• 实时定量荧光PCR
• 低丰度表达基因
• 低温胁迫
• 基因表达
• 标准曲线
• 相对定量 Real-time PCR
• Low abundance gene
• Cold stress
• Gene expression
• Standard curve
• Relative quantification

低丰度基因通常难以通过标准曲线法进行Real-time PCR。通过使用特异引物,对拟南芥低丰度表达基因CIPK7进行了转录水平上的定量分析,成功建立了可检测低丰度基因表达变化的Real-time PCR标准曲线定量方法。扩增CIPK7基因CDS全长,并对PCR产物进行纯化,使用纯化的PCR产物作为标准品,绘制标准曲线,对CIPK7基因的表达进行Real-time PCR分析。与常规Real-time PCR方法进行比较,结果表明,该方法得到的标准曲线,浓度区间范围广,线性关系好,能够很好地适用于低丰度基因的Real-time PCR标准曲线法定量。实验测得低温胁迫下拟南芥CIPK7基因的表达...

• 出版日期2014
• 单位甘肃省中医药研究院; 甘肃省中医院