幽门螺杆菌多靶点疫苗工程菌BIB发酵及纯化工艺研究

作者：潘兴; 王保宁; 杨靖; 李健春; 祝捷; 周永君; 王红仁; 李明远; 李婉宜

来源：成都医学院学报, 2014, 9(05): 538-544.

• 幽门螺杆菌
• 疫苗
• 高密度发酵
• 阳离子交换层析
• 尿素酶B亚单位 Helicobacter pylori
• Vaccine
• High density fermentation
• Cation-exchange chromatography
• Urease B subunit

目的初步建立重组幽门螺杆菌多靶点疫苗工程菌(BIB)的高密度发酵及其蛋白纯化工艺。方法以摇瓶发酵结果为基础,放大工艺至50L发酵罐中,对影响目的蛋白收率的因素如发酵培养基、工作种子接种量、诱导剂浓度、诱导起始时间、诱导持续时间及诱导剂添加方式等进行优化验证;并利用rBIB蛋白高等电点特性(pI=9.05),在pH 7.0~7.5的磷酸盐缓冲液中目的蛋白带正电荷,采用阳离子交换层析进行纯化,对阳离子交换层析填料及纯化缓冲液的pH进行优化。结果经高密度发酵后BIB菌体产量为70g/L,蛋白表达量为32%;rBIB蛋白经阳离子交换层析纯化后其纯度为91.8%。结论该工艺的初步建立为深入研究rBIB蛋...

• 出版日期2014
• 单位四川大学; 湖北医药学院; 四川万可泰生物技术有限责任公司