禽流感病毒A/PFV/Restock/34(H7N1)HA基因在昆虫/杆状病毒系统中的表达

作者：李贺; 孟庆文; 冉多良; 于康震; 陈化兰; 李永强; 吴东来

来源：中国预防兽医学报, 2006, (03): 294-297.

• 禽流感病毒
• 血凝素基因
• 重组杆状病毒
• 表达 avian influenza virus
• HA gene
• recombinant baculovirus
• expression

经RT-PCR扩增了禽流感病毒A/PFV/Restock/1/34(H7N1)1.7kbHA基因的cDNA,将其克隆到pMD18-T中并测序。在去除编码HA信号肽的核苷酸序列后,亚克隆到杆状病毒转移载体pBlueBacHis,筛选到重组质粒命名为pBlueBacHisH7HA,测序正确后与线性化的杆状病毒DNA(Bac-N-BlueTMDNA)共转染Sf9昆虫细胞,挑取蓝色蚀斑,经三轮蚀斑纯化,获得数株重组杆状病毒rpBlueHisH7HA。提取重组病毒DNA,经PCR证明目的基因片段已插入到杆状病毒基因组中,血凝实验、SDS-PAGE和Westernblot实验结果表明HA基因在重组杆状病毒...

• 出版日期2006
• 单位新疆农业大学; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室