烤鳕鱼片中基因组DNA提取条件优化及其应用

作者：刘珊珊^*; 李岩; 陈光; 赵冬梅; 张利伟; 朱娜

来源：食品工业, 2022, 43(03): 41-44.

• DNA提取
• 响应面法
• 烤鱼片
• 实时荧光PCR
• 鳕鱼

为了对烤鳕鱼片中的鳕鱼成分进行实时荧光PCR检测,将烤鳕鱼片基因组DNA的提取条件进行响应面法优化研究,以CTAB为裂解液,考察取样量、蛋白酶量、裂解温度等因素对提取质量的影响。每个因素的最佳水平由单因素试验确定。选择Box-Behnken方案进行设计并试验,以最终DNA浓度为响应值,利用响应面法对参数进行优化,最终得到烤鳕鱼片中基因组DNA的最佳提取条件:取样量0.2 g、加酶量45μL、裂解温度65℃。在该条件下进行试验,提取的基因组DNA实际浓度为627.0±13.0 ng/μL,与模型预计结果637.5 ng/μL的相对误差为1.66%,误差较小,适用于烤鱼片中基因组DNA的提取。利用优化方法对6种市售秦皇岛烤鳕鱼片进行DNA提取并进行鳕鱼成分的实时荧光PCR检测,所得结果均检出鳕鱼成分。

• 出版日期2022