人α1抗胰蛋白酶的分离纯化及其对C-BSA型大鼠肾炎模型的影响

作者：孙兆健; 蒋伟; 张英; 田建明^*; 王妍^*

来源：中国生物制品学杂志, 2020, 33(11): 1247-1252.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.003193

• α1抗胰蛋白酶
• Cohn组分Ⅳ
• 分离纯化
• 大鼠
• 肾炎

目的分离纯化α1抗胰蛋白酶(alpha 1-antitrypsin,AAT),并评价其对C-BSA型大鼠肾炎模型的影响。方法以Cohn组分Ⅳ(Cohn frcationⅣ,FⅣ)为原料,采用Q Sepharose Fast Flow阴离子交换层析和S-200凝胶过滤柱层析纯化AAT,底物显色法检测其生物学活性。建立阳离子化小牛血清蛋白型大鼠肾炎模型,分别注射5.75和11.5 mg/kg的AAT,同时设正常组(未建模),隔日经大鼠腹腔注射给药1次,连续注射4周,模型组和正常组注射等体积的PBS。检测各组大鼠的尿常规及24 h尿液总蛋白量,并对肾脏组织进行病理学检查,同时检测肾脏中IgG沉积及AAT、Desmin、Nephrin、Podocin的表达情况。结果纯化的AAT纯度为96%,浓度为11.85 mg/mL,活性回收率为47.67%,比活为5.37。与模型组比较,高剂量AAT组大鼠24 h尿蛋白量明显降低(P <0.05),尿常规部分指标有所改善,肾小球体积增大程度有所减轻;高、低剂量AAT组大鼠肾小球IgG沉积均略减少(P> 0.05),肾小球与肾小管AAT阳性表达量明显增加(P <0.001),肾小球Desmin蛋白有减轻趋势,但差异无统计学意义(P> 0.05);高剂量AAT组大鼠肾小球Nephrin及Podocin蛋白均明显增多(P <0.05),低剂量AAT组略有升高趋势,但差异无统计学意义(P> 0.05)。结论本纯化工艺可获得纯度较高的AAT,其对大鼠肾炎具有一定提高疗效的作用。

• 单位
  吉林省中医药科学院; 应用化学与生物技术学院; 深圳职业技术学院