大鼠谷氨酰胺合成酶RNA干扰表达载体的构建及其影响星形胶质细胞黏附的初探

作者：刘春兴; 张滨; 邹健

来源：南京医科大学学报(自然科学版), 2010, (10): 1397-1401.

• 谷氨酰胺合成酶
• 小干扰RNA
• 表达载体
• 细胞黏附
• 星形胶质细胞 GS
• siRNA
• eukaryotic expression vector
• adhesion
• astrocyte

目的:构建并鉴定大鼠谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)RNA干扰表达载体,并检测GS对星形胶质细胞黏附的影响。方法:利用软件根据GS mRNA序列设计特异性siRNA序列,与GS真核表达载体GS-EGFP以LipofectamineTM2000试剂联合转染Hela-G细胞,以GFP为指标鉴定其有效性;体外合成该siRNA插入序列,将其定向克隆至真核表达载体pRNATH1.l/Neo中并转染至大鼠星形胶质细胞中,以免疫细胞化学方法鉴定GS的表达;通过免疫化学法对actin特异性染色分析GSRNA干扰后对星形胶质细胞黏附的影响。结果:GS siRNA能有效抑制GS-E...

• 出版日期2010
• 单位南京医科大学