丙型肝炎病毒逆向点杂交基因分型方法的建立及初步应用

作者：杨光; 陈姝; 崔金环; 司建华; 谭家驹

来源：中华流行病学杂志, 2005, (06): 440-443.

• 丙型肝炎病毒
• 基因分型 Hepatitis C virus
• Genotyping

目的利用逆向点杂交技术建立丙型肝炎病毒(HCV)基因分型新方法。方法在HCV5’端非编码区(5’UTR)设计引物与分型探针,将活性氨基标记的分型探针依次固定在尼龙膜上,制成HCV基因分型逆向点杂交检测膜条。分离纯化血清中的HCVRNA,经逆转录反应和生物素标记引物聚合酶链反应(PCR)巢式扩增后,将扩增产物与检测膜条杂交,过氧化物酶和四甲基联苯胺显色,判断基因分型结果。最后,通过与基因测序结果比较确定新方法的有效性。从佛山地区丙型肝炎患者中随机抽取60份经荧光定量PCR方法对HCVRNA进行过定量分析的血清,用新建方法进行HCV基因分型检测。结果新建HCV逆向点杂交基因分型方法可对所有60份H...

• 出版日期2005
• 单位临床医学研究所; 佛山市第一人民医院