青藤碱对胃癌细胞SGC-7901生物学行为的影响及机制

作者：青泓屹^*; 魏寿江; 李勋; 周程继; 张肖; 祝晓娟; 刘作良

来源：安徽医科大学学报, 2020, 55(09): 1350-1356.

DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2020.09.007

• 青藤碱
• miR-33a-5p
• 乳酸脱氢酶A
• SGC-7901

目的探究青藤碱(SIN)对胃癌细胞SGC-7901增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及其机制。方法正常培养人胃正常黏膜上皮细胞GES-1、人胃癌细胞SGC-7901作对照组(Control),分别用0.5、1.0、2.5 mmol/L SIN处理细胞48 h,并设立阳性对照(50μmol/L塞来昔布),采用CCK-8法检测细胞生长,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell小室检测细胞侵袭,划痕实验检测细胞迁移,Western blot检测Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的表达;经在线预测软件分析miR-33a-5p和乳酸脱氢酶A(LDHA)靶向关系,并通过双荧光素酶报告确认;将miR-33a-5p mimics转染SGC-7901细胞,采用RT-qPCR检测miR-33a-5p和LDHA mRNA的表达;重组构建过表达LDHA载体转染SGC-7901细胞,用0.5、1、2.5 mmol/L SIN处理细胞48 h,检测细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移情况。结果与Control组相比,SIN可提高SGC-7901细胞凋亡率、Bax、cleaved caspase-3、E-cadherin及miR-33a-5p的表达,并降低其存活率、侵袭数、迁移率、Bcl-2、N-cadherin、Vimentin及LDHA mRNA的表达(P<0.05)。LDHA是miR-33a-5p的预测靶点。SIN可上调miR-33a-5p的表达,并下调LDHA mRNA的表达(P<0.05);与Contorl组相比,过表达LDHA后,细胞SGC-7901的凋亡率下降,其LDHA蛋白表达、存活率、侵袭数和迁移率上升(P<0.05);SIN处理后,细胞SGC-7901的凋亡率上升,其LDHA蛋白表达、存活率、侵袭数和迁移率下降(P<0.05);与pcDNA-LDHA组相比,干预SIN后,细胞SGC-7901的凋亡率上升,其存活率、侵袭数和迁移率下降(P<0.05)。结论 SIN可靶向miR-33a-5p下调LDHA水平,介导细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移等过程抑制胃癌细胞SGC-7901。

• 出版日期2020
• 单位川北医学院附属医院