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摘要
[目的]为钩距虾脊兰种质资源研究奠定基础。[方法]以钩距虾脊兰为试验材料,利用改良的CTAB法提取钩距虾脊兰基因组DNA,并对影响ISSR扩增反应的各因素进行优化。[结果]获得了高质量的钩距虾脊兰基因组DNA;同时,建立了最适的钩距虾脊兰ISSR-PCR体系,即25μl PCR反应体积中,2.5μl 10×PCR buffer,2.0 mmol/L MgCl2,100 ng模板DNA,240μmol/L dNTPs,1.75 UTaqDNA聚合酶,0.4μmol/L引物;最佳扩增程序为94℃预变性5 min,然后进行40个循环:94℃变性30 s,复性温度根据各引物的TM值略低1～2℃,30 ...
- 出版日期2009
- 单位南昌大学; 生命科学学院
