豆豉纤溶酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

作者：吕美云; 张新; 陆云华

来源：安徽农业科学, 2008, (06): 2270-2271.

• 豆豉纤溶酶
• 基因克隆
• 表达
• 毕赤酵母 Douchi fibrinolytic enzyme
• Gene cloning
• Expression
• Pichia pastoris

[目的]为豆豉纤溶酶的进一步研究与应用奠定基础。[方法]以从芽孢杆菌中提取的总DNA为模板,根据GenBank的豆豉纤溶酶基因(AY720895.2)DNA序列设计1对引物,克隆豆豉纤溶酶基因并进行序列测定。构建毕赤酵母表达载体pL3,在毕赤酵母中表达豆豉纤溶酶基因。[结果]经PCR扩增可获得约1.1 kb的DNA片段。序列分析表明所克隆DNA片段包含1个1089 bp的开放阅读框,编码363个氨基酸。该克隆基因与所发表的豆豉纤溶酶基因序列的核苷酸序列同源性为98%,而氨基酸序列同源性达100%。[结论]所克隆的豆豉溶纤酶基因在毕赤酵母中成功表达,且表达产物具有正常的生物学活性。

• 出版日期2008
• 单位宜春学院