摘要

根据已报道的植物铁结合蛋白基因的保守序列设计引物 ,用RT PCR方法 ,成功地从大豆总RNA中扩增出一大小为0 771kb的cDNA片断。将该片段克隆到pUCm T载体上 ,测序和序列的同源性分析表明该片断与Proudhon等 (1996)报道的大豆铁结合蛋白基因的氨基酸序列同源性达 95 %。利用pUCm -T和pBI12 1载体上共同的XbaⅠ和SacⅠ双酶切位点 ,构建了克隆片段的植物表达载体pSFKna。该载体含CaMV3 5S启动子、NOS终止子和NPT Ⅱ基因 ,在遗传转化中可用基因枪导入受体 ,并通过卡那霉素抗性筛选转化子。

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