大肠杆菌-链霉菌高效接合载体的构建及其应用

作者：莫宏波; 白林泉; 王胜兰; 杨克迁

来源：生物工程学报, 2004, (05): 662-666.

DOI：10.13345/j.cjb.2004.05.005

• 接合转移
• 接合子
• 接合性质粒
• 链霉菌

以链霉菌质粒SCP2 的衍生质粒pHJL4 0 0为基础 ,构建了能够在大肠杆菌到链霉菌之间进行高效接合转移的质粒pGH112。pGH112含有在大肠杆菌和链霉菌中复制起始位点 ,以及分别在大肠杆菌和链霉菌中进行筛选的抗性标记。用pGH112转化EscherichiacoliET12 5 6 7(pUZ80 0 2 )后 ,与天蓝链霉菌 (StreptomycescoelicolorA3(2 ) )、除虫链霉菌 (Streptomycesavermitilis)、变铅青链霉菌 (StreptomyceslividansTK5 4 )、毒三素链霉菌 (StreptomycestoxytriciniNRRL15 4 4 3)、委内瑞拉链霉菌 (Streptomyces.venezuelaeISP5 2 30 )和红色糖多孢菌 (Saccharopolyporaerythraea)进行接合 ,发现本文构建的pGH112与pKC1139相比 ,接合转移效率较高 ,稳定性好 ,而且宿主范围较广。把组成型启动子ermE 与绿色荧光蛋白基因 (gfp)克隆到本文构建的pGH112 ,通过接合转移到链霉菌中 ,gfp获得表达 ,证明其可以用作基因接合转移的有效工具载体 ,这为研究链霉菌的基因功能创造了有利条件

• 出版日期2004
• 单位上海交通大学; 中国科学院微生物研究所