铁皮石斛共性黄酮类成分新西兰牡荆苷Ⅱ的体外抗氧化与诱导HepG2细胞凋亡的作用

作者：罗颖懿; 李运容; 雷胄熙; 袁媛^*; 黄月纯; 魏刚^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2019, 25(01): 43-50.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20182210

• 铁皮石斛
• 黄酮苷
• 新西兰牡荆苷Ⅱ
• 抗氧化
• HepG2细胞
• 凋亡

目的:对不同道地种源铁皮石斛的共性黄酮类成分新西兰牡荆苷Ⅱ(芹菜素-6,8-二-C-葡萄糖苷,viceninⅡ)进行体外抗氧化及诱导肝癌Hep G2细胞凋亡的活性研究。方法:采用2,2-联苯基-1-苦基肼法(DPPH),2-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸法(ABTS)和铜离子还原法对viceninⅡ(0. 0051 g·L-1)进行体外的抗氧化活性研究;采用噻唑蓝(MTT)比色法检测viceninⅡ(12. 5100μmol·L-1)对人6种不同的肿瘤细胞体外的增殖抑制作用;后续凋亡实验viceninⅡ浓度为75μmol·L-1,采用Hoechst33258染色,荧光显微镜进行Hep G2细胞形态学观察;应用流式细胞术,磷脂结合蛋白V/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)检测Hep G2细胞凋亡率;采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(Real-time PCR)检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路及相关凋亡基因的mRNA表达。结果:ViceninⅡ质量浓度为1 g·L-1时,对DPPH的清除率和Cu2+还原率为48. 82%和22. 01%(P <0. 01);当viceninⅡ质量浓度为0. 5 g·L-1时,对ABTS清除率为86. 88%(P <0. 01); viceninⅡ显著抑制Hep G2细胞增殖并诱导凋亡,75μmol·L-1的viceninⅡ作用48 h后,细胞存活率为45. 69%(P <0. 01),细胞凋亡率为14. 57%(P <0. 01),升高B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)/Bcl-2,半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-8,p38,细胞外信号调节激(ERK),c-Jun氨基末端酶(JNK),核转录因子-κB(NF-κB) mRNA表达(P <0. 01)。结论:铁皮石斛不同道地种源的共性黄酮类成分新西兰牡荆苷Ⅱ在体外具有一定的抗氧化作用,能有效抑制Hep G2细胞增殖,并可能通过调控MAPK通路及Bax/Bcl-2途径诱导Hep G2细胞凋亡。

• 出版日期2019
• 单位广州中医药大学; 广西国际壮医医院; 第一临床医学院; 中国中医科学院