抗人CD40功能性嵌合抗体的制备及其高效表达

作者：化晓莉; 乔春霞; 黎燕; 张学光

来源：军事医学科学院院刊, 2010, (03): 225-229.

• CD40
• 抗体
• 单克隆
• 杂交瘤
• 嵌合抗体
• 真核表达 CD40
• antibody
• monoclonal
• hybridoma
• chimeric antibody
• eukaryotic expression

目的构建抗CD40嵌合抗体的真核表达载体,实现在真核细胞中的高效表达。方法采用RT-PCR法,从分泌鼠源抗人CD40抗体的杂交瘤细胞系5C11中钓取其轻、重链基因,进行序列测定。将5C11轻重链可变区基因分别克隆入表达载体pCMV-VH和pCMV-VL,构建成嵌合抗体(c5C11)的轻链真核表达载体5C11L-pCMV及重链真核表达载体5C11H-pCMV。将嵌合抗体的轻重链真核表达载体共转染入293T细胞,利用夹心ELISA法测定上清中c5C11的浓度,通过流式细胞术检测c5C11与膜抗原的特异性结合。通过生物信息学相关方法对c5C11的氨基酸序列进行合理改造,尝试在保持生物学功能的基础上提...

• 出版日期2010
• 单位苏州大学; 军事医学科学院基础医学研究所